本文阅读简介：

  • 1、麦氏标准比浊法原理是什么？怎么做
  • 2、比浊法测定微生物生长曲线有何优点
  • 3、比色法和比浊法的原理是什么？
  • 4、目视比浊法
  • 5、测定微生物生长量的时候，有一种方法叫做比浊法。哪位高手介绍下什么叫比浊法？详细点。
  • 6、比浊法的分析过程

麦氏标准比浊法原理是什么？怎么做

麦氏标准比浊法的原理是：麦氏比浊法又称Mcforland比浊法，它是根据细菌溶于水中存在一定的混浊度来测定细菌的浓度，是一种比较简单粗列的计算细菌浓度的方法。一般Mcforland比浊法有5个标准管，分别代表不同的浓度，我们可以用肉眼来比较你所测的细菌管和哪个标准管浊度相似，即可判定浓度。另外，也可用分光光度计来和标准管来比较，而算出你的浓度。

操作方法：

1.

轻摇标准试管。

2.

无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径（大小）的无菌试管中。

3.

以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水（NaCl），直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

比浊法测定微生物生长曲线有何优点

比浊法无法判断出微生物的死活，一般用于非动物细胞（细菌，真菌等），原理参照分光光度计，得出的数据相对不精确。优点是可以应用于较大密度和量的细胞。比浊法是用分光光度法对无色的微生物悬浮液进行测定，得到的是活细胞的数目，而血球板计数法是在光学显微镜下直接计数的方法，但得到的是包括死细胞在内的细胞数。血球计数板通常用于动物细胞，测量较为精确，使用台盼蓝染色以后可以分辨细胞的死活。不过也有缺点，一是假如测量的细胞的原始密度及高，在不断稀释的过程当中很容易产生误差，其次，血球计数板中假如细胞大量成团，则观察者很难进行计数。一般血球计数板要求4角上的4个相对较大的格子中数出的细胞总数在200个左右，这个时候是比较准确的。不同点总结起来就是，比浊法适用于密度大，非动物细胞，精确度低，不辨死活。血球计数板精度相对较高，常用于动物细胞，可辨别死活，适用于较低的密度。

比色法和比浊法的原理是什么？

比色比浊前应使比色管内试剂充分混匀，主要利用手腕赚动360度的旋摇操作来完成。

比色方法是将两管同置于白色背景上，从侧面观察。比浊方法是将两管同置于黑色或白色背景上，自上而下观察。

比色法用比色法测定时，应取对照品同时操作，除另有规定外，比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替对照品或供试品溶液，依次加入等量的相应试剂，并用同样方法处理，在规定的波长处测定对照品和供试品溶液的吸收度。

扩展资料：

在比色分析中，当入射光亮度一定时，液层厚度保持不变，则测得的吸光度A与溶液的浓度c成直线关系。在实际应用时，首先选择被测物质溶液的最大吸收波长(λmax)，在最大吸收波长时进行比色，灵敏度，然后配制一系列不同浓度的标准溶液；

在一定条件下进行显色，分别测定它们的吸光度，将测得的吸光度与浓度的关系作图，得到一条直线，称为标准曲线。测定未知试样时，应在与绘制标准曲线相同的条件下进行显色，测定其吸光度，从标准曲线上查得试样的浓度。

参考资料来源：百度百科-比色法

参考资料来源：百度百科-比浊法

目视比浊法

方法提要

浊度与透视度呈反比关系，水样与标准系列进行透视度比测，定值。本方法规定1000mL纯水中含高岭土1mg的浊度为1°。

本法适用于近海海域和大洋水浊度的测定。3个实验室分析了用无浊纯水配制水样，浓度分别为7.0mg/L和50.0mg/L，测试结果重复性相对标准偏差为3.78%，相对误差为4.10%。

试剂

无浊纯水取蒸馏水或去离子水，通过0.2μm滤膜抽滤，贮存于聚乙烯桶中，用过滤水淋洗聚乙烯桶2次，弃去初滤水200mL，最好当天制备。

滤膜(0.2μm)。

二氯化汞溶液(50g/L)(注意:二氯化汞剧毒，小心操作!)。

焦磷酸钠溶液(50g/L)。

高岭土(机选特号)。

浊度标准储备溶液将高岭土置于(105±1)℃烘箱中烘干2h，移入盛有硅胶的干燥器中，冷却30min。称取3～5g高岭土，置于玛瑙研钵中加少量水调成稀糊状，研磨约50min，全部转移入1000mL量筒中，补加纯水到1000mL标线处，充分搅拌均匀后，在(20±0.5)℃下静置24h。用虹吸法吸取上层800mL悬浊液移入第2个1000mL量筒中，补加无浊纯水到1000mL标线处，充分搅匀后，再次置于(20±0.5)℃下静放24h。用虹吸法吸除上层液800mL，留取底层200mL悬浊液并加纯水到1000mL标线，然后盛于1000mL棕色试剂瓶中，塞严保存。

浊度标准储备溶液浊度的标定量取50.0mL标准储备溶液于恒量(m1)的蒸发皿中，置于水浴锅上蒸干，移于105℃干燥箱中烘2h。置于硅胶干燥器中冷却30min，称量(m2)。重复烘干、冷却、称量步骤，直到两次质量差小于0.2mg。按下式计算浊度标准储备溶液中高岭土的质量浓度:

岩石矿物分析第四分册资源与环境调查分析技术

式中:ρ高岭土为浊度标准储备溶液中高岭土的质量浓度，mg/mL;V为量取浊度标准储备溶液的体积，50.0mL;m1为蒸发皿的质量，g;m2为蒸发皿加烘干后高岭土的质量，g。

此浊度标准储备溶液浊度=ρ高岭土×1000。

浊度标准中间溶液准确量取一定体积含有250mg高岭土的标准储备溶液置于1000mL容量瓶中，加入1.0g二氯化汞(HgCl2);溶解后，补加无浊纯水至标线，充分混匀，转入具橡皮塞的棕色试剂瓶中。此标准中间溶液浓度为0.25mg/mL。浊度为250°。

浊度标准溶液移取40.0mL浊度标准中间溶液置于100mL容量瓶中，加入0.50mL焦磷酸钠溶液，加无浊纯水至标线，混匀。此液浊度为100°。

校准曲线取12支100mL具塞比色管，分别加入0mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL、7.00mL、8.00mL、9.00mL、10.0mL浊度标准溶液，再加入50.0mL二氯化汞溶液，然后再加无浊纯水至标线，混匀。此系列浊度分别为0°、0.50°、1.00°、2.00°、3.00°、4.00°、5.00°、6.00°、7.00°、8.00°、9.00°、10.0°。

分析步骤

将混匀的水样，倾入具塞比色管中至标线，立即同标准系列比较定量。水样浊度为0°～10°范围的测定，用黑色背景，垂直目视比较而定;10°以上的测定用黄色方格坐标纸为背景，水平透视方格线条的清晰程度而定量。然后将测定值记入浑浊度记录表，取两位有效读数;若水样浊度超过100°，则需用无浊纯水稀释水样至可测范围，将测定值乘以稀释倍数，即为原水样浊度。

注意事项

1)每次量取水样或标准液时，必须将水样瓶横放，上下强烈振荡30次后，立即取出水样。

2)玻璃试剂瓶磨口与磨口塞之间，在启瓶对磨中，可增大所盛液体的浊度。因此所用水样瓶及试剂瓶，均应配换橡胶塞，并将胶塞置于盛纯水的烧杯中煮沸2h。

3)水样中具有迅速下沉的碎屑及粗大沉淀物都可被测定为浊度。不洁净的玻璃器皿和空气泡，以及扰乱水样表面能见度的振动都能造成虚假结果。

4)水样保存，在取样当天测定浊度。如果不可避免要保持更长时间，将水样保存暗处可达24h。如若在样品中加HgCl2固定剂，可保存22d。

5)除非另作说明，本法中所用试剂均为分析纯，水为无浊水或等效纯水。

测定微生物生长量的时候，有一种方法叫做比浊法。哪位高手介绍下什么叫比浊法？详细点。

比浊法又称浊度测定法,原理是悬浮颗粒在液体中造成透射光的减弱，减弱的程度与悬浮颗粒的量相关，据此可定量测定物质在溶液中呈悬浮状态时浓度的方法。也就是利用培养液中微生物的数量不同造成的吸光度差异来确定微生物的生长量。比浊法和比色法所依据的原理是相同的，实验方法也相似。通常，比色计或分光光度计都可用于比浊分析。也有专门用于比浊分析的仪器，即浊度计或比浊计。

比浊法的分析过程

当光束通过一含有悬浮质点的介质时，由于悬浮质点对光的散射作用和选择性的吸收，使透射光的强度减弱。在比浊法中，透光度和悬浮物质浓度的关系类似于朗伯－比尔定律（见紫外-可见分光光度法）的数学式：

式中s为浊光度（或浊率）,表示由于悬浮物的散射作用而引起的光强度衰减;I0和I分别为入射光强度（通过纯溶剂）和透射光强度(通过混浊样品)；b为光程长度；c为悬浮质点的浓度；K为常数，有时又叫浊度系数,其值与粒子的大小、形状、入射光的波长、悬浮物和介质的折射率有关。

在分析时，必须先做工作曲线,以s对已知散射物的浓度c作图。显然,比浊法和比色法所依据的原理是相同的，实验方法也相似。通常，比色计或分光光度计都可用于比浊分析。也有专门用于比浊分析的仪器，即浊度计或比浊计。采用这种光散射测量技术必须注意：

①该法适合于分析混浊度较大的样品，光束通过试样后，透射光强度应有显著减弱。I0与I相差较大,则测量误差较小。

②在制作工作曲线和样品时，应尽可能保持操作条件一致，以保证悬浮质点大小和形状的均匀性，以及生成稳定的胶态悬浮体。反应物的浓度、加入的顺序和速度，介质的酸度、温度、放置时间等对悬浮质点的大小和均匀性都有影响。必要时可加入一些表面活性剂或其他保护胶体以防止悬浮物迅速沉降。

③如测量的悬浮物试样具有颜色，则应选择最小吸收的波长作入射光束。